ကမာမှို laccase NRC 620 ထုတ်လုပ်မှုနှင့် ဇီဝဓာတုဗေဒဆိုင်ရာ လက္ခဏာရပ်များကို ဖော်ထုတ်ခြင်းနှင့် ပန်းသီးဖျော်ရည်သန့်စင်ရာတွင် ၎င်း၏ ထိရောက်မှုကို အကဲဖြတ်ခြင်း။

၂၈°C တွင် ၂၅ ရက်ကြာ static incubation ပြုလုပ်ပြီးနောက် *Pleurotus ostreatus* NRC620 မှ laccase သည် မှိုယဉ်ကျေးမှုအလယ်အလတ်တွင် အမြင့်ဆုံးလုပ်ဆောင်မှုကို ပြသခဲ့သည်။ ဤအင်ဇိုင်းအတွက် အကောင်းဆုံး pH နှင့် အပူချိန်တန်ဖိုးများသည် အသီးသီး ၃.၀ နှင့် ၇၀°C ဖြစ်သည်။ ၄၀°C နှင့် ၅၀°C တွင် ၂ နာရီကြာ incubation ပြုလုပ်ပြီးနောက် အင်ဇိုင်းလှုပ်ရှားမှုသည် အသီးသီး ၆၈.၃၃% နှင့် ၅၉.၆၁% ထိန်းသိမ်းထားနိုင်ခဲ့သည်။ citrate-phosphate buffer (pH 7.0) တွင် ၂ နာရီကြာ incubation ပြုလုပ်ပြီးနောက် အင်ဇိုင်းလှုပ်ရှားမှုသည် ၁၀၀% တွင် ရှိနေခဲ့သည်။ 10 mM MgSO₄ နှင့် CuSO₄ ထည့်သွင်းခြင်းဖြင့် အင်ဇိုင်းလှုပ်ရှားမှုကို ခန့်မှန်းခြေအားဖြင့် ၂၁% နှင့် ၃၅% အသီးသီး မြှင့်တင်ပေးခဲ့ပြီး NaCl၊ MnCl₂၊ KCl နှင့် CaCl₂ တို့က အင်ဇိုင်းလှုပ်ရှားမှုကို ဟန့်တားခဲ့သည်။ ABTS ကို substrate အဖြစ်အသုံးပြုခြင်းဖြင့် *Pleurotus ostreatus* NRC 620 laccase ၏ kinetic parameters (Km နှင့် Vmax) များသည် အသီးသီး 1.99 mM နှင့် 16,217 μmol min−1 L−1 ဖြစ်သည်။ ပန်းသီးဖျော်ရည်နမူနာများကို enzymatic treatment ပြုလုပ်ခြင်းသည် pH နှင့် viscosity နှစ်မျိုးလုံးကို သိသိသာသာ လျော့ကျစေပြီး ဤလျော့ကျမှုသည် သိုလှောင်ချိန် တိုးလာခြင်းနှင့် ဆက်စပ်နေသည်။ Laccase treatment သည် ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ စုစုပေါင်း phenolic ပါဝင်မှုကို အနည်းငယ် လျော့ကျစေသော်လည်း antioxidant activity တွင် လျော့ကျမှုကို မတွေ့ရှိရပါ။
မကြာသေးမီနှစ်များအတွင်း သုတေသီများသည် အစားအသောက်လုပ်ငန်းတွင် စိမ်းလန်းသော ဇီဝနည်းပညာအသုံးချမှုကို အာရုံစိုက်ခဲ့ကြသည်။ လက်ကေ့စ်သည် အစားအသောက်လုပ်ငန်းတွင် အသုံးဝင်ဆုံး အင်ဇိုင်းများထဲမှ တစ်ခုဖြစ်ပြီး ဖျော်ရည်ထုတ်လုပ်ခြင်း၊ မုန့်ဖုတ်ခြင်း၊ ဝိုင်တည်ငြိမ်စေခြင်းနှင့် အစားအသောက်ထုတ်ကုန်များ၏ ခန္ဓာကိုယ်အရည်အသွေးကို မြှင့်တင်ခြင်းကဲ့သို့သော နယ်ပယ်များတွင် အသုံးချမှုများကို တွေ့ရှိရသည်။¹မြင့်မားသောအပင်များနှင့် အဏုဇီဝရုပ်များစွာသည် လက်ကေ့စ်ကို ထုတ်လွှတ်ကြသည်။²deuteromycetes၊ ascomycetes နှင့် basidiomycetes ကဲ့သို့သော မှိုများသည်လည်း laccase ကို ထုတ်လုပ်နိုင်သည်။³Laccase (EC 1.10.3.2) သည် ကြေးနီအက်တမ်သုံးမျိုးပါဝင်သောစနစ်ကို အသုံးပြု၍ ရေသို့ မော်လီကျူးအောက်ဆီဂျင်ကို လျှော့ချပေးသည့် အပြာရောင်အောက်ဆီဒေ့စ်ဖြစ်ပြီး၊ ထို့ကြောင့် ဖီနောလစ်ဒြပ်ပေါင်းအမျိုးမျိုးနှင့် အမွှေးနံ့သာအမိုင်းများ ဓာတ်တိုးစေသည်။ သစ်သီးနှင့် ဟင်းသီးဟင်းရွက်ဖျော်ရည်များ ထုတ်လုပ်စဉ်တွင် အင်ဇိုင်းဖြင့်ပြုလုပ်ထားသောနှင့် အင်ဇိုင်းမဟုတ်သော အညိုရောင်ပြောင်းခြင်းသည် အရေးကြီးသောပြဿနာများဖြစ်သည်။⁴ဤပစ္စည်းများသည် ဖျော်ရည်၏ အရောင်၊ အရသာနှင့် ရနံ့ကို ဆိုးကျိုးသက်ရောက်စေသောကြောင့် ၎င်းတို့ကို ဖယ်ရှားရပါမည်။⁵
သစ်သီးဝလံအားလုံးတွင် ပန်းသီးသည် ကမ္ဘာတစ်ဝှမ်းနှင့် ဥရောပသမဂ္ဂတွင် အများဆုံးစားသုံးသော သစ်သီးဝလံဖြစ်သည်။ ၂၀၁၉ ခုနှစ်တွင် ပန်းသီးထုတ်လုပ်မှုသည် ကမ္ဘာလုံးဆိုင်ရာတွင် တတိယနေရာတွင် ရပ်တည်ခဲ့ပြီး တန်ချိန် ၈၇ သန်းကျော် ရှိသည်။⁶ပန်းသီးတွင် flavonoids နှင့် caffeic acid နှင့် chlorogenic acid ကဲ့သို့သော phenolic acids များအပါအဝင် phenolic ဒြပ်ပေါင်းများစွာပါဝင်သည်။⁷ပန်းသီးဖျော်ရည်ကို ၎င်း၏ ကြည်လင်သောပုံစံဖြင့် သောက်သုံးလေ့ရှိသောကြောင့်၊ ဖီနောလစ် အစိတ်အပိုင်း ၅၀% မှ ၉၀% ခန့်သည် စစ်ထုတ်ခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်အတွင်း ဆုံးရှုံးသွားပါသည်။⁸ယနေ့ခေတ်တွင် စားသုံးသူများသည် ပိုလီဖီနောပါဝင်မှု မြင့်မားသော မှိုင်းနေသော ပန်းသီးဖျော်ရည်ကဲ့သို့သော အနည်းဆုံး ပြုပြင်ထားသော ထုတ်ကုန်များကို ရွေးချယ်လေ့ရှိကြသည်။ သို့သော် ဖီနောလစ်ပါဝင်မှု မြင့်မားသောကြောင့် ဤပန်းသီးဖျော်ရည်အမျိုးအစားသည် အရောင်ပြောင်းခြင်းနှင့် မည်းမှောင်ခြင်းတို့ကို အထူးခံစားရလွယ်ပါသည်။⁹ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ မည်းမှောင်မှုကို လျှော့ချရန် သို့မဟုတ် ကာကွယ်ရန်အတွက် ၆၀-၉၀°C တွင် ပိုးသတ်ခြင်းကဲ့သို့သော အပူပေးနည်းလမ်းများ အပါအဝင် နည်းပညာအမျိုးမျိုးကို အသုံးပြုပါသည်။¹⁰သို့သော်လည်း Sauceda-Gálvez ၏ သုတေသနပြုချက်အရ သိရသည်။¹¹အပူဖြင့် ပြုပြင်ခြင်းသည် ပျံ့လွင့်လွယ်သော ဓာတုပစ္စည်းများကို ဖျက်ဆီးပစ်နိုင်ပြီး ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ ခန္ဓာကိုယ်အတွင်းရှိ အရည်အသွေးများကို ထိခိုက်စေနိုင်သည်။ အပူဖြင့် ပြုပြင်ခြင်းနည်းလမ်းများအစား အခြားရွေးချယ်စရာများတွင် supercritical carbon dioxide၊ ultraviolet radiation၊ ultrasound၊ မြင့်မားသော hydrostatic pressure သို့မဟုတ် မြင့်မားသောဖိအားဖြင့် တစ်သားတည်းဖြစ်အောင်ပြုလုပ်ခြင်းတို့ ပါဝင်သည်။¹²ဤနည်းပညာများ၏ ထိရောက်မှုနှင့် သင့်လျော်သော သစ်သီးဖျော်ရည်များ၏ အထွက်နှုန်းသည် အသုံးပြုထားသော ကန့်သတ်ချက်များနှင့် ထုတ်ကုန်ဝိသေသလက္ခဏာများပေါ်တွင် မူတည်ပါသည်။ ၎င်းတို့ကို ကျယ်ကျယ်ပြန့်ပြန့်အသုံးပြုခြင်းသည် ကုန်ကျစရိတ်မြင့်မားခြင်း၊ အချို့သော အစားအစာထုတ်ကုန်များ၏ အရည်အသွေးအပေါ် ဆိုးကျိုးများ သို့မဟုတ် အင်ဇိုင်းမလုံလောက်စွာ မလှုပ်ရှားနိုင်ခြင်းတို့ကြောင့် အကန့်အသတ်ရှိသည်။^{၁၃၊ ၁၄}
လက်ကေ့စ်ကို သစ်သီးဖျော်ရည်ကို တည်ငြိမ်စေပြီး ကြည်လင်စေရန်အတွက် အသုံးပြုနိုင်ပါသည်။¹⁵ဂေါ့ခ်မန်း နှင့် အဖွဲ့။¹⁶အသီးဖျော်ရည်ကို ကြည်လင်စေရန်အတွက် laccase ကိုအသုံးပြုရန် အကြံပြုအပ်ပါသည်။ ၎င်းသည် ဖီနောလစ်ဒြပ်ပေါင်းများကို မည်သည့် ultrafiltration membrane ဖြင့်မဆို အလွယ်တကူ ဖယ်ရှားနိုင်သော polymers သို့မဟုတ် oligomers များအဖြစ်သို့ ပြောင်းလဲခြင်းဖြင့် ထိရောက်စွာ ဖယ်ရှားပေးသောကြောင့် ပန်းသီးဖျော်ရည်သည် ၅၀°C တွင် ခြောက်ပတ်အထိ တည်ငြိမ်သောအရောင်နှင့် ကြည်လင်မှုကို ထိန်းသိမ်းပေးပါသည်။ သန့်စင်ထားသော *Trichoderma* laccase ကို alumina အစေ့များပေါ်တွင် ခိုင်မြဲစွာ ထားရှိပြီး ပန်းသီးဖျော်ရည်တွင် အဏုဇီဝပိုးမွှားများ ညစ်ညမ်းမှုကြောင့် ဖြစ်ပေါ်လာသော အရသာမရှိသော ဒြပ်ပေါင်းများကို ရွေးချယ်ဖယ်ရှားရန်အတွက် အသုံးပြုခဲ့သည်။¹⁷
ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ ပျံ့လွင့်လွယ်သော အစိတ်အပိုင်းများ၏ 80-90% ခန့်သည် esters နှင့် aldehydes များဖြစ်ပြီး ဖျော်ရည်ကို ထူးခြားသောရနံ့ပေးစွမ်းသည်။¹⁸*Trametes versicolor* မှ Laccase ကို ပန်းသီးရည်ကြည်လင်စေရန်အတွက် အုန်းခွံငယ်မှရရှိသော သဘာဝအမျှင်ဖြင့် ပြုလုပ်ထားသော ဈေးသက်သာသော အထောက်အပံ့ပေါ်တွင် လှုပ်ရှား၍မရပါ။¹⁹ယခင်လေ့လာမှုများသည် အင်ဇိုင်းမပါသော သို့မဟုတ် immobilization နည်းလမ်းများ သို့မဟုတ် ultrafiltration နှင့်ပေါင်းစပ်၍ ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ တည်ငြိမ်မှု (အရောင်နှင့် နောက်ကျိမှု) ကို စုံစမ်းစစ်ဆေးခဲ့ကြသည်။^၅,၁၉သို့သော်၊ သိုလှောင်မှုအတွင်း ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာဓာတုဂုဏ်သတ္တိများအပေါ် မှိုလက်ကေ့စ်များ၏ အကျိုးသက်ရောက်မှုမှာ မရှင်းလင်းသေးပါ။ ထို့ကြောင့်၊ ဤလေ့လာမှု၏ ရည်ရွယ်ချက်မှာ မှိုလက်ကေ့စ်များဖြင့် ကုသပြီးနောက်နှင့် နှစ်ပတ်ကြာ ရေခဲသေတ္တာထဲတွင် သိမ်းဆည်းပြီးနောက် ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာဓာတုဂုဏ်သတ္တိများ၊ ဖီနောလစ်ဒြပ်ပေါင်းပါဝင်မှုနှင့် အင်တီအောက်ဆီဒင့်လုပ်ဆောင်ချက်တို့တွင် ပြောင်းလဲမှုများကို စမ်းသပ်စုံစမ်းစစ်ဆေးရန်ဖြစ်သည်။ လက်ကေ့စ်များတွင် ဖီနောလစ်ဒြပ်ပေါင်းများကို အောက်ဆီဒိုက်ဖြစ်စေနိုင်သော စွမ်းရည်ရှိပြီး ဖျော်ရည်သန့်စင်ခြင်းအပါအဝင် စက်မှုလုပ်ငန်းဆိုင်ရာ လုပ်ငန်းစဉ်အမျိုးမျိုးတွင် အသုံးပြုရန် မျှော်လင့်ချက်ကောင်းစေသည်။ ဤလေ့လာမှုသည် *Pleurotus ostreatus* NRC 620 မှ လက်ကေ့စ်များကို စစ်ဆေးခဲ့ပြီး ၎င်းတို့၏ ဖျော်ရည်သန့်စင်ခြင်းတွင် ၎င်းတို့၏ လုပ်ဆောင်ချက်နှင့် ထိရောက်မှုအတွက် အကောင်းဆုံးအခြေအနေများကို အာရုံစိုက်ခဲ့သည်။ ကမာမှို (P. ostreatus NRC 620) အပေါ် သုတေသနပြုမှုသည် အကန့်အသတ်ရှိနေဆဲဖြစ်သော်လည်း၊ ယခင်လေ့လာမှုများသည် Trametes versicolor နှင့် Ganoderma lucidum ကဲ့သို့သော မှိုရင်းမြစ်အမျိုးမျိုးမှ အင်ဇိုင်းများကို စစ်ဆေးခဲ့သည်။ ဤလေ့လာမှု၏ ရည်ရွယ်ချက်မှာ အစားအစာလုပ်ငန်းတွင် ဤအင်ဇိုင်း၏ အလားအလာရှိသော အသုံးချမှုကို အကဲဖြတ်ရန်နှင့် ၎င်း၏ထူးခြားသောဂုဏ်သတ္တိများ၊ အထူးသဖြင့် ၎င်း၏ အကောင်းဆုံး pH နှင့် အပူချိန်ကို မီးမောင်းထိုးပြရန်ဖြစ်သည်။
2,2′-Azooxybis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) ကို Sigma-Aldrich (ကနေဒါ) မှ ဝယ်ယူခဲ့သည်။ အခြား reagents အားလုံးသည် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာနိုင်သော အဆင့်ဖြစ်သည်။
အမျိုးသားသုတေသနစင်တာ၏ အဏုဇီဝပိုးမွှားယဉ်ကျေးမှုစုဆောင်းရေးစင်တာသည် သိရှိထားသော ကမာမှိုမျိုးကွဲ NRC620 ကို ရရှိခဲ့သည်။ မျိုးခွဲမွေးမြူပြီးနောက်၊ ဤမျိုးကွဲကို ၄°C ရှိ အာလူး dextrose agar slants များတွင် သိမ်းဆည်းထားသည်။ ကာကွယ်ဆေးပြင်ဆင်သည့်နည်းလမ်းမှာ အောက်ပါအတိုင်းဖြစ်သည်- ၁၀ ရက်သား၊ အပြည့်အဝဖွံ့ဖြိုးပြီးသော mycelium ကို အာလူး dextrose agar ပြားများပေါ်တွင် ထည့်သွင်းပြီး ၂၈°C တွင် ပြုစုပျိုးထောင်ခဲ့သည်။ ၁၀ ရက်အကြာတွင်၊ အချင်း ၁၂ မီလီမီတာရှိသော mycelium blocks သုံးခုကို ပိုးသတ်ထားသော သတ္တု punch ကို အသုံးပြု၍ agar media မှ ဖယ်ရှားပြီး Othman et al မှ ယခင်ကဖော်ပြခဲ့သည့်အတိုင်း ပိုးသတ်ထားသော ယဉ်ကျေးမှုအလယ်အလတ် (pH 5.0) ၅၀ mL ပါရှိသော ဂွမ်းပလပ်များပါသည့် ၂၅၀ mL Erlenmeyer flasks များတွင် ထည့်ထားသည်။²⁰)။ ယဉ်ကျေးမှုများကို ၂၈°C တွင် ၁၈ ရက်ကြာ ထားခဲ့သည်။ ထို့နောက် ယဉ်ကျေးမှုများကို Whatman No. 1 စစ်ထုတ်စက္ကူမှတစ်ဆင့် စစ်ထုတ်ခဲ့ပြီး ရရှိလာသော supernatant သည် အင်ဇိုင်းအရင်းအမြစ်အဖြစ် ဆောင်ရွက်ခဲ့သည်။
ABTS ကို substrate အဖြစ်အသုံးပြု၍ Laccase activity ကို ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။ ဓာတ်ပြုမှုအရောအနှော (2 mL) တွင် 0.3 mM ABTS (0.1 M sodium citrate buffer, pH 4.5 တွင်ပျော်ဝင်ထားသည်) 500 μL နှင့် လိုအပ်သော enzyme sample ပမာဏကို distilled water ဖြင့်ရောစပ်ထားသည်။^{၂၁၊၂၂}laccase သည် အခန်းအပူချိန် (28 °C ± 2) တွင် ABTS ကို အောက်ဆီဒေးရှင်းလုပ်နိုင်သည်ကို ထည့်သွင်းစဉ်းစားလျှင်၊ ABTS အောက်ဆီဒေးရှင်းကို 420 nm (ε) တွင် absorbance တိုးလာမှုကို တိုင်းတာခြင်းဖြင့် ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။_၄၂၀= ၃၆,၀၀၀ စင်တီမီတာ^-1 M ^-1) Agilent Carry-100 UV spectrophotometer ကို အသုံးပြု၍။ တစ်မိနစ်လျှင် ABTS 1 μmol အောက်ဆီဒေးရှင်းပြုလုပ်ရန် laccase activity ယူနစ်တစ်ခု လိုအပ်သည်။ အတွင်းပိုင်းထိန်းချုပ်မှုအဖြစ် bovine serum albumin ကို အသုံးပြု၍ Bradford နည်းလမ်းဖြင့် ပရိုတင်းပါဝင်မှုကို ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။^{၂၃၊၂၄}
ကမာမှိုမျိုးကွဲ NRC 620 မှ အင်ဇိုင်းကို ရရှိပြီးနောက်၊ ၎င်း၏ လုပ်ဆောင်ချက်ကို ၂၈ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်တွင် တည်ငြိမ်သောအခြေအနေများအောက်တွင် ၂၅ ရက်ကြာ စိုက်ပျိုးချိန်အပိုင်းအခြားအမျိုးမျိုးတွင် တိုင်းတာခဲ့သည်။
လက်ကေ့စ်လှုပ်ရှားမှုအပေါ် အပူချိန်၏ အကျိုးသက်ရောက်မှုကို လေ့လာရန်အတွက် အပူချိန် ၂၀ မှ ၉၀ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်အတွင်း စမ်းသပ်မှုများကို ပြုလုပ်ခဲ့သည်။ အင်ဇိုင်းထည့်သွင်းပြီး ဓာတ်ပြုမှုမစတင်မီ၊ ဘာဖာ (0.1 M ဆိုဒီယမ် စီထရိတ်၊ pH 4.5) နှင့် အလွှာ (ABTS) ကို ရောနှောပြီး အပူချိန်အမျိုးမျိုးတွင် ၅ မိနစ်ခန့် ထားခဲ့သည်။ အင်ဇိုင်း၏ အပူတည်ငြိမ်မှုကို 0.05 M ဆိုဒီယမ် ဖော့စဖိတ် ဘာဖာ (pH 7.0) တွင် ၄၀၊ ၅၀၊ ၆၀ နှင့် ၇၀ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်တွင် ၂ နာရီကြာ ထားခြင်းဖြင့် အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။ ထို့နောက် အကြွင်းအကျန်လှုပ်ရှားမှုကို ABTS အလွှာကို အသုံးပြု၍ အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။
pH တည်ငြိမ်မှုကို အကဲဖြတ်ရန်အတွက် ABTS ကို 0.1 M citrate-phosphate buffer များတွင် substrate အဖြစ် 40°C တွင် နှစ်နာရီကြာ ထားခဲ့သည်။ ABTS ကို substrate အဖြစ် အသုံးပြု၍ laccase activity အပေါ် pH ၏ အကျိုးသက်ရောက်မှုကို incubation ပြုလုပ်ပြီးနောက် တွက်ချက်ခဲ့သည်။
လက်ကေ့စ်ကို သတ္တုအိုင်းယွန်းအမျိုးမျိုး (Mg2+၊ Cu2+၊ Co2+၊ Ca2+၊ Zn2+၊ K+၊ Na+ နှင့် Mn2+) ပါဝင်သော ဆိုဒီယမ်ဖော့စဖိတ်ဘာဖာ (0.05 M၊ pH 7.0) တွင် အသီးသီး 2.5 mM နှင့် 10 mM အာရုံစူးစိုက်မှုများတွင် 10 မိနစ်ကြာ ထားခဲ့သည်။ ထို့နောက် ဓာတ်ပြုမှုကို စတင်ရန် အလွှာ (ABTS) ကို ထည့်သွင်းခဲ့ပြီး ဆွေမျိုးလှုပ်ရှားမှုကို အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။
kinetic parameters (Vmax နှင့် Km) ကိုဆုံးဖြတ်ရန် pH 4.5 တွင် အမျိုးမျိုးသော செறிவு (0.025–3 mM) တွင် laccase ဖြင့် ABTS အောက်ဆီဒေးရှင်းကို တိုင်းတာခဲ့သည်။^{ကိန်းသေများ}Michaelis-Menten ညီမျှခြင်း၏ အချက်အလက်များကို Lineweaver-Burk plot ကို အသုံးပြု၍ တွက်ချက်ခဲ့ပြီး၊ ၎င်းသည် ဓာတ်ပြုမှုနှုန်း၏ အပြန်အလှန်တန်ဖိုးကို substrate အာရုံစူးစိုက်မှု၏ function အဖြစ် ပုံဖော်ပေးသည်။ kinetic constant များကို GraphPad Prism version 6.01 software ကို အသုံးပြု၍ Lineweaver-Burk plot မှ တွက်ချက်ခဲ့သည်။
ပန်းသီးများကို ရေပိုက်ရေဖြင့် သေချာစွာဆေးကြောပြီးနောက်၊ ၎င်းတို့ကို ထက်ခြမ်းခြမ်းပြီး ဂျာမနီနိုင်ငံထုတ် Braun MP80 ပန်းသီးဖျော်ရည်စက်ဖြင့် အပြည့်အဝ အလိုအလျောက် ညှစ်ထုတ်ခဲ့သည်။ ဖျော်ရည်ကို ချိစ်အဝတ်စလေးထပ်ဖြင့် စစ်ထုတ်ခဲ့သည်။ ထိန်းချုပ်အုပ်စုတွင် အင်ဇိုင်းများ မထည့်ဘဲ၊ ၂.၀% laccase (စမ်းသပ်ထားသော အထိရောက်ဆုံး ပါဝင်မှု) ကို လတ်လတ်ဆတ်ဆတ် ပြင်ဆင်ထားသော ပန်းသီးဖျော်ရည်ထဲသို့ ထည့်ပြီးနောက် ၄°C တွင် နှစ်ပတ်ကြာ သိမ်းဆည်းထားသည်။
Boulton et al. ၏ နည်းလမ်းအရ တိုင်းတာနိုင်သော အက်ဆစ်ဓာတ် (TA) နှင့် pH ကို ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။^{အယ်လ.၂၇}။ ဒစ်ဂျစ်တယ် pH မီတာ (JENWAY 3510 pH မီတာ) ကို အသုံးပြု၍ နမူနာတစ်ခုစီ၏ pH ကို တိုင်းတာခဲ့သည်။ Titratable acidity (TA) ကို အောက်ပါဖော်မြူလာကို အသုံးပြု၍ malic acid ကို အခြေခံ၍ တွက်ချက်ခဲ့သည်။
ဤတွင် V နှင့် C တို့သည် titration တွင်အသုံးပြုသော ဆိုဒီယမ်ဟိုက်ဒရောက်ဆိုဒ် ပျော်ရည်၏ ထုထည် (mL) နှင့် ပါဝင်မှု (0.1 mol/L) အသီးသီးဖြစ်သည်။ K သည် malic acid conversion coefficient ဖြစ်ပြီး 0.067 နှင့် ညီမျှပြီး W သည် ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ mass (g) ဖြစ်သည်။
စုစုပေါင်းပျော်ဝင်နိုင်သော အစိုင်အခဲများ (^TDS) ဖျော်ရည်နမူနာအားလုံး၏ ပါဝင်မှုကို PAL-1 အိတ်ဆောင် ရီဖရက်တိုမီတာ (ATAGO၊ တိုကျို၊ ဂျပန်) ကို အသုံးပြု၍ ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။ တိုင်းတာမှုတစ်ခုစီပြီးနောက်၊ မှန်ဘီလူးကို အိုင်းယွန်းကင်းစင်သောရေဖြင့် ဆေးကြောပြီး ပန်းသီးဖျော်ရည်နမူနာတစ်ခုစီကို သုံးကြိမ်စမ်းသပ်ခဲ့သည်။ နမူနာတစ်ခုစီအတွက် တန်ဖိုးကို တိုင်းတာမှုသုံးခုကို ပျမ်းမျှခြင်းဖြင့် တွက်ချက်ခဲ့သည်။ ပန်းသီးဖျော်ရည်နမူနာတစ်ခုစီအတွက် ပျမ်းမျှ ± စံသွေဖည်မှုကိုလည်း ဤရလဒ်များကို ပျမ်းမျှခြင်းဖြင့် တွက်ချက်ခဲ့သည်။
ပန်းသီးဖျော်ရည်နမူနာများ၏ viscoelasticity ကို rotational viscometer (RV, Rheotest 2, Germany) ကို အသုံးပြု၍ အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။ နမူနာကို viscometer ၏ “S2″ ဆလင်ဒါအတွင်း ထားခဲ့သည်။ Apparent viscosity ကို shear stress versus shear rate curve ၏ slope ဖြင့် ကိုယ်စားပြုပြီး ၎င်းကို shear stress နှင့် shear rates အမျိုးမျိုး (1.00 မှ 437.4 s⁻¹) တွင် သက်ဆိုင်ရာ curves များမှ တွက်ချက်ခဲ့သည်။ Apparent viscosity တွက်ချက်ရန် ဖော်မြူလာမှာ အောက်ပါအတိုင်းဖြစ်သည်။
η သည် ထင်ရှားသော viscosity (cP)၊ τ သည် shear stress (dyn/cm²)၊ γ သည် shear rate (sec⁻¹)၊ နှင့် (τ) ကို အောက်ပါဖော်မြူလာကို အသုံးပြု၍ torque (α) နှင့် cylinder (Z) တန်ဖိုးများကို အသုံးပြု၍ တွက်ချက်သည်- τ = Z . α။
Meidav ​​​​et ၏နည်းလမ်းအရ browning index ကိုဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်^{အယ်လ.၂၉}။ ၁၀ မီလီလီတာရှိသော ဖျော်ရည်နမူနာကို 2750 xg တွင် ၁၀ မိနစ်ကြာ centrifuge လုပ်ခဲ့သည်။ ဖျော်ရည် supernatant ၅ မီလီလီတာကို ၉၅% အီသနော ၅ မီလီလီတာနှင့် ရောစပ်ခဲ့သည်။ Shimadzu UV spectrophotometer (UV-1601 PC) ကို အသုံးပြု၍ ရောစပ်ထားသော အရည်၏ absorbance ကို 420 nm တွင် တိုင်းတာခဲ့သည်။
Boulton et al မှဖော်ပြထားသည့်အတိုင်း Folin-Ciocalteu reagent ကို အသုံးပြု၍ စုစုပေါင်း ဖီနောလစ်ပါဝင်မှု (TPC) ကို အရောင်တိုင်းတာခြင်းဖြင့် ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။^[၂၇]]။ 0 မှ 500 mg/L အထိ ပါဝင်မှုများအတွက် gallic acid ၏ စံသတ်မှတ်ထားသော မျဉ်းကွေးတစ်ခုကို တည်ဆောက်ထားသည် (^r²= 0.997)။ ရလဒ်များကို gallic acid equivalents (mg GAE/mL) အဖြစ် ဖော်ပြထားသည်။
ပန်းသီးဖျော်ရည် ၂၅ μL ထဲသို့ ပေါင်းခံရေ ၁၂၅ μL နှင့် FRAP ပျော်ရည် ၂၈၅၀ μL ထည့်ပြီး မှောင်မိုက်သောနေရာတွင် ထားပါ။³⁰အနည်းဆုံး။ ထို့နောက် Shimadzu UV spectrophotometer (UV-1601 PC) ကို အသုံးပြု၍ 593 nm တွင် absorbance ကို တိုင်းတာပါ။ FRAP reagent ကို 300 mM acetate buffer (pH 3.6)၊ 20 mM iron(III) chloride နှင့် 10 mM 2,4,6-tris(2-pyridyl)triazine (TPTZ) (40 mM HCl တွင် ပျော်ဝင်) ကို 10:1:1 အချိုးဖြင့် ရောစပ်ပြီး ပြင်ဆင်ခဲ့ပါတယ်။ Trolox ကို စံနှုန်းအဖြစ် အသုံးပြု၍ standard curve တစ်ခုကို ထုတ်ပေးခဲ့ပါတယ် (^R²= 0.999)၊ ရလဒ်များကို μM Trolox/mL အဖြစ် ဖော်ပြထားသည်။
DPPH ဖရီးရယ်ဒီကယ်များကို ဖယ်ရှားနိုင်စွမ်းကို အကဲဖြတ်ရန်အတွက် ပြုပြင်ထားသောနှင့် မပြုပြင်ရသေးသော ဖျော်ရည်များ၏ အင်တီအောက်ဆီးဒင့် လုပ်ဆောင်ချက်ကို DPPH နည်းလမ်းကို အသုံးပြု၍ ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။³¹ဖျော်ရည် ၁၀ မိုက်ခရိုလီတာများကို မီသနောတွင် DPPH ပျော်ရည် ၁ မီလီလီတာ (100 μM) နှင့် ရောမွှေပါ။ မှောင်မိုက်ထဲတွင် မိနစ် ၃၀ ကြာ ဓာတ်ပြုပြီးနောက်၊ Shimadzu UV spectrophotometer (UV-1601 PC) ကို အသုံးပြု၍ 517 nm တွင် အရောအနှော၏ absorbance ကို တိုင်းတာခဲ့သည်။ ရလဒ်များကို calibration curve (_^R2= ၀.၉၉၀)။
ရရှိလာသောဒေတာများအရ NRC 620 oyster မှိုများတွင် အမြင့်ဆုံး laccase ထုတ်လုပ်မှုကို fermentation ပြုလုပ်သည့် ၁၈ ရက်မြောက်နေ့အကုန်တွင် 1302 U/L လုပ်ဆောင်ချက်ရောက်ရှိခဲ့ကြောင်း ပြသခဲ့သည်။ ၎င်းသည် laccase ထုတ်လုပ်ရန် အကောင်းဆုံးစိုက်ပျိုးချိန်ကို ဆုံးဖြတ်ရာတွင် အခြေခံအဖြစ် ဆောင်ရွက်ခဲ့သည် (ပုံ ၁)။ အင်ဇိုင်းထုတ်လုပ်မှုသည် စိုက်ပျိုးချိန်တိုးလာသည်နှင့်အမျှ တိုးလာသော်လည်း တိုးတက်မှုနှုန်းသည် စိုက်ပျိုးချိန်နှင့် တိုက်ရိုက်အချိုးကျခြင်းမရှိပါ။ ၂၁ ရက်အကြာတွင် အင်ဇိုင်းလှုပ်ရှားမှုသည် 90 U/L သာတိုးလာခဲ့သည် (1390 U/L အထိ)။ ထို့ကြောင့် ထုတ်ကုန်အထွက်နှုန်းနှင့် စိုက်ပျိုးချိန်တိုးလာခြင်း၏ စီးပွားရေးအကျိုးကျေးဇူးများကို ဟန်ချက်ညီစေရန်အတွက် ၁၈ ရက်ကို အကောင်းဆုံးစိုက်ပျိုးချိန်အဖြစ် နောက်ဆုံးတွင် ရွေးချယ်ခဲ့သည်။
Pleurotus ostreatus NRC 620 တွင် စိုက်ပျိုးချိန်၏ laccase အထွက်နှုန်းအပေါ် အကျိုးသက်ရောက်မှု။ မှိုမှိုတုံး သုံးခု (၁၂ မီလီမီတာ) ကို ပိုးသတ်ထားသော အလတ်စား ၅၀ မီလီလီတာထဲသို့ ထည့်သွင်းပြီးနောက် ၂၈ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်တွင် မတူညီသောအချိန်များအတွက် မွေးမြူခဲ့သည်။
အခြားလေ့လာမှုများနှင့် ကိုက်ညီစွာ၊ ကျွန်ုပ်တို့၏ရလဒ်များက မှိုများမှ laccase ထုတ်လွှတ်မှုအမြင့်ဆုံးရရှိရန် အကောင်းဆုံးယဉ်ကျေးမှုကာလသည် ရက်ပေါင်း ၇ ရက်မှ ၃၆ ရက်အကြားဖြစ်နိုင်ဖွယ်ရှိကြောင်း ညွှန်ပြနေသည်။³²Ezike နှင့် အဖွဲ့၏ အဆိုအရ³³, *Trametes polyzona* WRF03 သည် အချဉ်ဖောက်ခြင်း ကိုးရက်မြောက်နေ့အကုန်တွင် laccase အမြင့်ဆုံးပမာဏကို ထုတ်လုပ်ခဲ့ပြီး 1637 U/mg ပရိုတင်း၏ သီးခြားလုပ်ဆောင်ချက်ဖြင့် ထုတ်လုပ်ခဲ့သည်။ ထို့အပြင်၊ Othman နှင့်အဖွဲ့သည်³⁴*Trichoderma harzianum* S7113 သည် စိုက်ပျိုးပြီး ငါးရက်မြောက်နေ့တွင် laccase များစွာထုတ်လွှတ်သည်ကို တွေ့ရှိခဲ့သည်။ laccase ထုတ်လုပ်မှုနှုန်းသည် ၁၄ ရက်မြောက်နေ့တွင် အမြင့်ဆုံးအဆင့်သို့ရောက်ရှိပြီးနောက် တဖြည်းဖြည်းလျော့နည်းသွားသည်။³⁴အင်ဇိုင်းထုတ်လွှတ်မှုသည် အဓိကကြီးထွားမှုအဆင့်တွင်လည်း ဖြစ်ပေါ်နိုင်သော်လည်း၊ ၎င်းသည် အလယ်အလတ်အဆင့်တွင် အမြင့်ဆုံးရောက်ပြီး ကာဗွန် သို့မဟုတ် နိုက်ထရိုဂျင်အရင်းအမြစ်ကို စားသုံးခြင်းဖြင့် ဖြစ်ပေါ်လာပါသည်။^{၃၄၊ ၃၅}
Pleurotus ostreatus NRC 620 မှ laccase သည် ၅၀°C မှ ၈၀°C အထိ ကျယ်ပြန့်သော အပူချိန်အပိုင်းအခြားတွင် မြင့်မားသော လုပ်ဆောင်ချက်ကို ပြသခဲ့ပြီး၊ အမြင့်ဆုံးလုပ်ဆောင်ချက်နှင့် နီးကပ်လာသော်လည်း (၆၉-၉၈%)၊ ၎င်း၏ အမြင့်ဆုံးလုပ်ဆောင်ချက်ကို ၇၀°C တွင် တွေ့ရှိရသည် (ပုံ ၂က)။ ဤအပူချိန်အပိုင်းအခြားပြင်ပတွင်၊ အင်ဇိုင်းလုပ်ဆောင်ချက်သည် ၇၀°C ခန့်တွင် လျော့နည်းသွားသည်။ ဤရလဒ်များက အင်ဇိုင်းသည် မြင့်မားသောအပူချိန်များတွင် တက်ကြွနေကြောင်း အကြံပြုထားပြီး၊ မြင့်မားသောအပူချိန်သည် ဓာတ်ပြုမှု၏ kinetic energy ကို တိုးစေသောကြောင့် ဖြစ်နိုင်သည်။
*Pleurotus ostreatus* NRC 620 တွင် laccase လုပ်ဆောင်ချက်အပေါ် ဓာတ်ပြုမှုအပူချိန် (က) နှင့် pH (ခ) ၏ အကျိုးသက်ရောက်မှု။ အင်ဇိုင်းထည့်ခြင်းနှင့် ဓာတ်ပြုမှုမစတင်မီ ၂၀ မှ ၉၀ °C အထိ အပူချိန်များကို ရောစပ်ထားသောအရာကို မတူညီသော အပူချိန်များတွင် ၅ မိနစ်ကြိုတင် incubation လုပ်ခြင်းဖြင့် ရရှိခဲ့သည်။ pH အကွာအဝေး ၂.၅ မှ ၇.၀ အတွင်း 0.1 M citrate-phosphate buffer ပါဝင်သော ပျော်ရည်များတွင် ABTS ကို substrate အဖြစ် အသုံးပြု၍ laccase လုပ်ဆောင်ချက်အပေါ် pH ၏ အကျိုးသက်ရောက်မှုကို အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။
Ezike ရဲ့ အဆိုအရ^{အယ်လ.၃၃}*Trametes polyzona* WRF03 laccase အတွက် အကောင်းဆုံးအပူချိန်မှာ 55 °C ဖြစ်ပြီး *Ganoderma lucidum* အတွက် အကောင်းဆုံးအပူချိန်နှင့် အတူတူပင်ဖြစ်သည်။^laccase36*Trametes polyzona* KU-RNW02737 အတွက် အကောင်းဆုံးအပူချိန် (50 °C) နှင့် ဆင်တူသည်။^{လက်ကေ့စ်} . ^{ဘော်လ်ဒရီယန် ၃၈}အခြား လစ်နင်ပြိုကွဲစေသော အင်ဇိုင်းစနစ်များကဲ့သို့ပင် လက်ကေ့စ်အတွက် အကောင်းဆုံးအပူချိန်အပိုင်းအခြားမှာ ၅၀ မှ ၇၀ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်ကြားတွင် ရှိကြောင်း မှတ်ချက်ပြုထားသည်။
ရလဒ်များအရ အင်ဇိုင်းသည် pH 3.0 တွင် အမြင့်ဆုံးလုပ်ဆောင်ချက်ကို ပြသခဲ့ပြီး pH 3.5 တွင် 94% လုပ်ဆောင်ချက်အထိ ရောက်ရှိခဲ့သည်။ သို့သော် 2.5 မှ 7.0 အထိ ကျယ်ပြန့်သော pH အပိုင်းအခြားတွင် တက်ကြွနေခဲ့သည် (ပုံ 2b)။ ထို့အပြင်၊ ကြားနေ သို့မဟုတ် အယ်ကာလိုင်း အခြေအနေများနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက အက်ဆစ်ဓာတ်အခြေအနေများတွင် ပိုမိုမြင့်မားသော လုပ်ဆောင်ချက်ကို ပြသခဲ့သည်။ ၎င်း၏လုပ်ဆောင်ချက်သည် 2.5 မှ 4.5 အထိ pH အပိုင်းအခြားတွင် အနည်းဆုံး 77% ရှိနေသော်လည်း pH 7.0 တွင် ခန့်မှန်းခြေအားဖြင့် 38% သာ ရောက်ရှိခဲ့သည်။ *Trametes polyzona* WRF03 မှ laccase အတွက် အကောင်းဆုံး pH မှာ 4.533 ဖြစ်ပြီး *Trametes polyzona* KU-RNW02737၊ *Trichoderma harzanium* 39၊ *Pleurotus* sp. 40 နှင့် *Trametes hirsuta* 41 မှ laccase များအတွက် pH နှင့် အတူတူပင်ဖြစ်သည်။ သို့သော် Chairin et al ၏ လေ့လာမှုအရ...⁴², *Polymorpha f. sp.* WR710-1 မှ laccase အတွက် အကောင်းဆုံး pH သည် 2.2 ဖြစ်ပြီး *Polymorpha f. sp.* IBL-04 မှ laccase အတွက် အကောင်းဆုံး pH သည် 5.043 ဖြစ်သည်။ T2/T3 laccase ၏ ကြေးနီအက်တမ်များနှင့် hydroxide anions (laccase inhibitor) များ ချည်နှောင်ခြင်းသည် ကြားနေ သို့မဟုတ် အယ်ကာလိုင်း pH အခြေအနေများအောက်တွင် laccase လှုပ်ရှားမှု လျော့နည်းရခြင်း၏ အကြောင်းရင်း ဖြစ်နိုင်သည်။ ၎င်းသည် T1 စင်တာမှ T2/T3 စင်တာသို့ အတွင်းပိုင်း အီလက်ထရွန် လွှဲပြောင်းမှုကို အနှောင့်အယှက် ဖြစ်စေနိုင်ပြီး^{ကန့်သတ်ခြင်း}အင်ဇိုင်းလှုပ်ရှားမှု ၂၃,၄၄
မတူညီသော အပူချိန်များတွင် အင်ဇိုင်းကို ပေါက်ဖွားစေခြင်းဖြင့်၊ ပေါက်ဖွားချိန်နှင့် အပူချိန် နှစ်မျိုးလုံးသည် အင်ဇိုင်းတည်ငြိမ်မှုကို သက်ရောက်မှုရှိကြောင်း တွေ့ရှိခဲ့သည်။ မှတ်သားစရာကောင်းသည်မှာ *Trametes polyzona* NRC 620 မှ laccase သည် ၄၀ ℃ နှင့် ၅၀ ℃ တွင် ပိုမိုမြင့်မားသော တည်ငြိမ်မှုကို ပြသခဲ့ပြီး ၁၂၀ မိနစ်အကြာတွင် ၎င်း၏ ကနဦးလုပ်ဆောင်ချက်၏ ၆၈.၃၃% နှင့် ၅၉.၆၁% အသီးသီး ထိန်းသိမ်းထားနိုင်သည် (ပုံ ၃က)။ ဆန့်ကျင်ဘက်အားဖြင့်၊ တူညီသောအခြေအနေများ (၄၀ ℃ နှင့် ၅၀ ℃၊ ၁၂၀ မိနစ်) အောက်တွင်၊ *Trametes polyzona* WRF03 မှ laccase သည် ၎င်း၏လုပ်ဆောင်ချက်၏ ၆၄.၃၈% နှင့် ၄၂.၉၂% အသီးသီး ထိန်းသိမ်းထားနိုင်သည်။³³ဆန့်ကျင်ဘက်အနေနဲ့၊ incubation time နဲ့ အပူချိန် တိုးလာတာက *Trametes polyzona* NRC 620 laccase ရဲ့ တည်ငြိမ်မှုကို လျော့ကျစေပါတယ်။ 60℃ နဲ့ 70℃ မှာ 60 မိနစ်ကြာ incubation လုပ်ပြီးနောက်၊ ၎င်းရဲ့ activity ဟာ အသီးသီး 39.24% နဲ့ 1.72% အထိ ကျဆင်းသွားပါတယ် (ပုံ 3a)။ စမ်းသပ်မှုရလဒ်တွေနဲ့ ကိုက်ညီစွာ၊ *Trametes polyzona* WRF03 မှ laccase ဟာ အပူကုသမှုလုပ်ငန်းစဉ်တစ်လျှောက်လုံး 40℃ နဲ့ 50℃ မှာ ပိုမိုမြင့်မားတဲ့ တည်ငြိမ်မှုကို ပြသခဲ့ပါတယ်။³³အလားတူပင်၊ Lueangjaroenkit et^{အယ်လ.၃၇}နှင့် ဥက္ကဋ္ဌ^{အယ်လ.၄၂}Trametes polyzona KURNW027 နှင့် Trametes polyzona WR710-1 မှ laccases များ၏ တည်ငြိမ်မှုကို အသီးသီး ၅၀°C တွင် ၁ နာရီကြာ ဖော်ပြခဲ့သည်။ ဇီဝနည်းပညာနယ်ပယ်အမျိုးမျိုးတွင် အသုံးချနိုင်သော အသုံးဝင်သော ဇီဝဓာတ်ကူပစ္စည်းတစ်ခုအနေဖြင့် laccase သည် အပူချိန်ကျယ်ပြန့်သောအပိုင်းအခြားတွင် ကောင်းမွန်သော တည်ငြိမ်မှုနှင့် စွမ်းဆောင်ရည်ရှိသင့်သည်။
*Pleurotus ostreatus* NRC 620 မှ laccase ၏ သာမိုစတက်တစ် တည်ငြိမ်မှု (က) နှင့် pH တည်ငြိမ်မှု (ခ)။ သာမိုစတက်တစ် တည်ငြိမ်မှုကို 40၊ 50၊ 60 နှင့် 70 °C တွင် 0.05 M ဆိုဒီယမ် ဖော့စဖိတ် ဘာဖာ (pH 7.0) တွင် အင်ဇိုင်း ပျော်ရည်ကို အသီးသီး 2 နာရီကြာ ပေါက်ဖွားစေခြင်းဖြင့် အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။ pH တည်ငြိမ်မှုကို 0.1 M citrate ဘာဖာနှင့် Tris ဘာဖာ (pH 3၊ 4၊ 6 နှင့် 7) တွင် 40 °C တွင် 2 နာရီကြာ ပေါက်ဖွားစေခြင်းဖြင့် အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။ ပေါက်ဖွားပြီးနောက် အကြွင်းအကျန် လှုပ်ရှားမှုကို ABTS ကို substrate အဖြစ် အသုံးပြု၍ တွက်ချက်ခဲ့သည်။
အင်ဇိုင်းအသုံးပြုမှုနှင့် သိုလှောင်မှုအတွက် အကောင်းဆုံးအခြေအနေများကို ဆုံးဖြတ်ရန်အတွက်၊ pH သည် laccase တည်ငြိမ်မှုအပေါ် အကျိုးသက်ရောက်မှုကို ကျွန်ုပ်တို့ စုံစမ်းစစ်ဆေးခဲ့ပါသည်။ pH တန်ဖိုးအမျိုးမျိုးနှင့် ထိတွေ့ခြင်းသည် ပရိုတင်းဖွဲ့စည်းပုံ၏ တည်ငြိမ်မှုကို သိသိသာသာ သက်ရောက်မှုရှိပြီး၊ ထို့ကြောင့် အင်ဇိုင်းမော်လီကျူး၏ တည်ငြိမ်မှုနှင့် လုပ်ဆောင်ချက်ကို လွှမ်းမိုးပါသည်။ ရလဒ်များအရ အင်ဇိုင်းသည် အက်ဆစ်ဓာတ်အခြေအနေများအောက်တွင် တည်ငြိမ်မှုနည်းပါးသော်လည်း၊ pH တန်ဖိုးများမြင့်မားသော (ကြားနေနှင့် အယ်ကာလိုင်းဒေသများ) တွင် ပိုမိုကောင်းမွန်သော တည်ငြိမ်မှုကို ပြသခဲ့သည်။ pH တန်ဖိုး ၇.၀၊ ၆.၀၊ ၄.၀ နှင့် ၃.၀ တွင်၊ မိနစ် ၁၂၀ အကြာတွင် အင်ဇိုင်းထိန်းသိမ်းမှုနှုန်းမှာ ၁၀၀%၊ ၆၂.၅၄%၊ ၅၂.၃၉% နှင့် ၁၁.၁၄% အသီးသီးဖြစ်သည် (ပုံ ၃ခ)။ *Strombus multisus* WRF03 laccase သည် ကြားနေ pH တန်ဖိုးများ (၅.၅–၆.၅) တွင် မြင့်မားသော တည်ငြိမ်မှုနှင့် အက်ဆစ် pH တန်ဖိုးများ (၄.၀ အောက်) တွင် တည်ငြိမ်မှုနည်းပါးကြောင်း ပြသခဲ့သည်။ pH ၅.၅၊ ၆.၀ နှင့် ၆.၅ တွင် ၁၂၀ မိနစ်အကြာတွင် အင်ဇိုင်းထိန်းသိမ်းမှုနှုန်းမှာ အသီးသီး ၈၂%၊ ၁၀၀% နှင့် ၉၃% ခန့်ရှိသည်။³³ခိုင်ရင် နှင့် အဖွဲ့။⁴²Sayed et al. မှ Trametes polyzona WR710-1 မှ laccase သည် pH 6.0 မှ 7.0 အတိုင်းအတာတွင် တည်ငြိမ်ကြောင်း မှတ်ချက်ပြုခဲ့သည်။⁴⁵laccase သည် ကြားနေ pH အခြေအနေများတွင် ပိုမိုတည်ငြိမ်ကြောင်း ပြသခဲ့သည်။ သို့သော် Cerrena unicolor မှ laccase သည် အယ်ကာလိုင်းအခြေအနေများ (pH 9.0) တွင်လည်း တည်ငြိမ်မှုကို ပြသခဲ့သည်။⁴⁶။ လေ့လာထားသော လက်ကေ့စ်များသည် ကျယ်ပြန့်သော pH အတိုင်းအတာတွင် မြင့်မားသောတည်ငြိမ်မှုကို ပြသခဲ့သည်။ ၎င်းသည် စက်မှုလုပ်ငန်းအသုံးချမှုများအတွက် အရေးကြီးသော ဝိသေသလက္ခဏာတစ်ခု ဖြစ်နိုင်သည်။
အချို့သောသတ္တုအိုင်းယွန်းများသည် အင်ဇိုင်းလှုပ်ရှားမှုအပေါ် လှုံ့ဆော်ပေးသောနှင့် တားဆီးပေးသော အာနိသင်နှစ်မျိုးလုံးရှိသောကြောင့်၊ စက်မှုလုပ်ငန်းအသုံးချမှုများတွင် အင်ဇိုင်းလှုပ်ရှားမှုအပေါ် ၎င်းတို့၏အာနိသင်များကို ထည့်သွင်းစဉ်းစားရမည်။ သတ္တုအိုင်းယွန်းများသည် ဆဲလ်ပြင်ပအင်ဇိုင်းများ၏ တည်ငြိမ်မှုနှင့် ပေါင်းစပ်မှုကို ထိခိုက်စေနိုင်သော အဖြစ်များသော ပတ်ဝန်းကျင်ညစ်ညမ်းမှုများဖြစ်သောကြောင့် ၎င်းသည် အရေးကြီးပါသည်။⁴⁷*Pleurotus ostreatus* NRC 620 မှ လက်ကေ့စ်အပေါ် သတ္တုအိုင်းယွန်းများစွာ၏ အကျိုးသက်ရောက်မှုများကို စုံစမ်းစစ်ဆေးရန်အတွက်၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် သက်ဆိုင်ရာစမ်းသပ်မှုများကို ပြုလုပ်ခဲ့ပါသည်။ ပုံ ၄ တွင်ပြထားသည့်အတိုင်း၊ အသုံးပြုသော သတ္တုအမျိုးအစားပေါ် မူတည်၍ သတ္တုအိုင်းယွန်းပါဝင်မှုကို 2.5 mM မှ 10 mM အထိ တိုးမြှင့်ခြင်းသည် အင်ဇိုင်းလုပ်ဆောင်ချက်ကို ဆိုးကျိုးသက်ရောက်စေပါသည်။ ဥပမာအားဖြင့်၊^Mg²⁺ , ^Co²⁺ , ^{ဇင့်²⁺}နှင့်^Cu²⁺အင်ဇိုင်းလုပ်ဆောင်ချက်ကို လှုံ့ဆော်ပေးပြီး အသက်ဝင်စေနိုင်သည်၊^Na⁺ , ^Mn²⁺ , ^Ca²⁺နှင့်^K⁺အင်ဇိုင်းလှုပ်ရှားမှုကို ဟန့်တားနိုင်သည်။ 10 mM ပြင်းအားတွင် Cu²⁺ နှင့် Mg²⁺ အိုင်းယွန်းများသည် *Pleurotus ostreatus* NRC 620 မှ လက်ကေ့စ်လှုပ်ရှားမှု၏ အထိရောက်ဆုံး activator များဖြစ်ပြီး အသီးသီး 34% နှင့် 20% ခန့် activation degree ကို ပေးစွမ်းသည်။ သို့သော် 10 mM ပြင်းအားတွင် Ca²⁺ အိုင်းယွန်းများသည် လက်ကေ့စ်လှုပ်ရှားမှု၏ အထိရောက်ဆုံး inhibitor များဖြစ်ပြီး အင်ဇိုင်းလှုပ်ရှားမှုကို 60% ခန့် လျော့ကျစေသည်။
Pleurotus ostreatus NRC 620 laccase ၏ လုပ်ဆောင်ချက်အပေါ် သတ္တုအိုင်းယွန်းများ၏ အကျိုးသက်ရောက်မှု။ laccase ကို 2.5 mM နှင့် 10 mM ပြင်းအားများတွင် သတ္တုအိုင်းယွန်းအမျိုးမျိုးပါဝင်သော ဆိုဒီယမ်ဖော့စဖိတ်ဘာဖာ (0.05 M၊ pH 7.0) တွင် ၁၀ မိနစ်ခန့် ထားခဲ့သည်။ ထို့နောက် substrate (ABTS) ထည့်သွင်းခြင်းဖြင့် ဓာတ်ပြုမှုကို စတင်ခဲ့ပြီး ထို့နောက် relative activity ကို တိုင်းတာခဲ့သည်။
ကျွန်ုပ်တို့၏ရလဒ်များသည် Mg²⁺ နှင့် Cu²⁺ တို့သည် *Trametes polyzona* WRF03³ ၏လုပ်ဆောင်ချက်ကို မြှင့်တင်ပေးသည်ဟု တွေ့ရှိခဲ့သော အခြားစာရေးဆရာများ၏ရလဒ်များနှင့် ကိုက်ညီပါသည်။ Castaño et al.⁴⁸ သည် *Xylaria* sp. မှ laccase ကို ကြေးနီအိုင်းယွန်းများ (Cu²⁺) မှ အတိုင်းအတာတစ်ခုအထိ လှုံ့ဆော်ပေးသည်ကို တွေ့ရှိခဲ့သည်။ ထို့အပြင်၊ Foroutanfar et al.⁴⁹ နှင့် Si et al.⁵⁰ တို့သည် *Paraconiothyrium variabile* နှင့် *Trametes pubescens* မှ laccases များတွင် အလားတူလေ့လာမှုများကို အသီးသီးပြုလုပ်ခဲ့ကြသည်။ ဤအင်ဇိုင်း၏ type II copper-binding site (T2) ကို ပေးထားသောအာရုံစူးစိုက်မှုတွင် Cu²⁺ ဖြင့် ပြည့်နှက်နိုင်ပြီး၊ ၎င်းသည် Cu²⁺³⁹ အာရုံစူးစိုက်မှုမြင့်မားသောအခါ laccase လုပ်ဆောင်ချက်ကို လှုံ့ဆော်ပေးရခြင်းအကြောင်းရင်းကို ရှင်းပြနိုင်ပါသည်။ အဖြူရောင်ပုပ်မှိုလက်ကေ့စ်များသည် ကြေးနီအက်တမ်များစွာပါဝင်သော အောက်ဆီဒေ့စ်များဖြစ်သောကြောင့်၊ လက်ကေ့စ်လှုပ်ရှားမှုအပေါ် ကြေးနီအိုင်းယွန်းများ၏ အကျိုးသက်ရောက်မှုများသည် ကွဲပြားပြီး လှုံ့ဆော်ပေးသောနှင့် တားဆီးပေးသောမှ ကြားနေအထိ အမျိုးမျိုးရှိသည်။⁵¹ ဆန့်ကျင်ဘက်အနေဖြင့်၊ Zhou နှင့်အဖွဲ့သည်^{။ [52]}သတင်းပို့ထားသည်^Cu²⁺ထိုင်ဝမ်မြေအောက်ခြ (Odontotermes formosanus) ၏ လက်ကေ့စ်လှုပ်ရှားမှုကို ဟန့်တားခဲ့သည်။ သို့သော် Cerena sp. HYB07 ၏ လက်ကေ့စ်များသည်^[၅၃]နှင့် Clitocybe maxima^[၅၄]ကြေးနီအိုင်းယွန်းများ၏ သက်ရောက်မှုကို မခံခဲ့ရပါ။
substrate specificity ကို ၎င်း၏ kinetic parameters (Km နှင့် Vmax) ဖြင့် ကိုယ်စားပြုသည်။ substrate သည် enzyme နှင့် binding affinity ပိုများလေ၊ Km တန်ဖိုး နိမ့်လေဖြစ်ပြီး substrate specificity မြင့်လေဖြစ်သည်။^{၃၊ ၂၁၊ ၅၅}*Pleurotus ostreatus* NRC 620 မှ laccase ၏ kinetic parameters (Km နှင့် Vmax) ကို Lineweaver-Burk plot ဖြင့် GraphPad Prism 6.0 software ကို အသုံးပြု၍ ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည် (ပုံ ၅)။ ABTS ကို substrate အဖြစ်အသုံးပြုသောအခါ၊ ရလဒ်များသည် 1.99 mM နှင့် 16217 μmol ဖြစ်သည်။^{မိနစ်⁻¹ L⁻¹၊}အသီးသီး။ Elsayed နှင့် အဖွဲ့။²¹ABTS အောက်ဆီဒေးရှင်းအတွက် Km တန်ဖိုးများသည် အသီးသီး 0.1 mM နှင့် 0.064 mM ဖြစ်ကြောင်း ဖော်ပြခဲ့ပြီး၊ ၎င်းသည် ABTS အတွက် Lac A နှင့် Lac B isoenzymes များ၏ မြင့်မားသော ဆွဲငင်အားကို ညွှန်ပြနေသည်။ ထို့အပြင်၊ Vmax တန်ဖိုးများသည် 0.182 μmol ဖြစ်သည်^{မိနစ်⁻¹}နှင့် ၀.၆၀၃ မိုက်ခရိုမို^{မိနစ်⁻¹}ရရှိလာသော Km တန်ဖိုးသည် Trametes polyzona WRF03 (8.66 mM) ထက် နိမ့်ကျသည်။ ထို့အပြင် ၎င်းတို့၏ Vmax တန်ဖိုး (1429 mmol min⁻¹) သည်လည်း^{အောက်ပိုင်း}ABTS ကို substrate အဖြစ်အသုံးပြုသည့်အခါ။၃၃ အလားတူပင်၊ Lentinus squarrosulus MR13 နှင့် Trametes sp. AH28-2 laccase ပါဝင်မှုများ၏ Km တန်ဖိုးများသည် အသီးသီး 0.0714 mM နှင့် 0.025 mM ရှိပြီး Vmax တန်ဖိုးများသည် 0.0091 mM min−1 နှင့် 0.67 mM min−1 mg−1 (ABTS နှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက) ဖြစ်သည်။^{အသီးသီး ၅၆၊ ၅၇}
*Pleurotus ostreatus* NRC 620 မှ laccase ၏ လှုပ်ရှားမှုအပေါ် ABTS ပါဝင်မှု၏ အကျိုးသက်ရောက်မှုကို စုံစမ်းစစ်ဆေးခဲ့ပြီး၊ ကနဦးဓာတ်ပြုမှုအလျင်နှင့် ABTS ပါဝင်မှု၏ အပြန်အလှန်အကျိုးသက်ရောက်မှု၏ Lineweaver-Burk plot ကို plot လုပ်ခဲ့သည်။ kinetic parameters (Vmax နှင့် Km) ကို ဆုံးဖြတ်ရန် laccase ၏ မတူညီသော ပါဝင်မှုများ (0.025–3.0 mM) ဖြင့် ABTS ၏ အောက်ဆီဒေးရှင်းဓာတ်ပြုမှုကို pH 4.5 တွင် တိုင်းတာခဲ့သည်။ Michaelis-Menten kinetic constants များကို ဓာတ်ပြုမှုအလျင်နှင့် substrate ပါဝင်မှု၏ အပြန်အလှန်အကျိုးသက်ရောက်မှု၏ Lineweaver-Burk plot ကို အသုံးပြု၍ တွက်ချက်ခဲ့သည်။ kinetic constants များကို GraphPad Prism 6.01 software ကို အသုံးပြု၍ Lineweaver-Burk plot မှ တွက်ချက်ခဲ့သည်။
ပက်တစ်နေ့စ်ကဲ့သို့သော ရိုးရာကြည်လင်စေသော အင်ဇိုင်းများသည် ပက်တစ်ပစ္စည်းများကို ရေဓာတ်ပြိုကွဲစေပြီး စေးကပ်မှုနှင့် မှိုင်းခြင်းကို လျှော့ချပေးသည်။ ၎င်းတို့သည် ဖွဲ့စည်းပုံဆိုင်ရာ polysaccharides များကို ထိရောက်စွာ ဖြိုခွဲပြီး cellulases နှင့် hemicellulases ကဲ့သို့သော အခြားအင်ဇိုင်းများနှင့် ပေါင်းစပ်အသုံးပြုလေ့ရှိပြီး အထွက်နှုန်းနှင့် ကြည်လင်မှုကို မြှင့်တင်ပေးပါသည်။ သို့သော် ပက်တစ်နေ့စ်များသည် အထူးသဖြင့် ပန်းသီးနှင့် စပျစ်သီးဖျော်ရည်ကဲ့သို့သော ဖျော်ရည်များတွင် မှိုင်းခြင်းနှင့် အောက်ဆီဒေးရှင်းဖြစ်စေသော အညိုရောင်ဖြစ်ခြင်း၏ အဓိကအကြောင်းရင်းများဖြစ်သည့် ဖီနောလစ်ဒြပ်ပေါင်းများကို တိတိကျကျ ပစ်မှတ်ထားခြင်းမရှိပါ။⁵⁸ဆန့်ကျင်ဘက်အနေနဲ့၊ လက်ကေ့စ်တွေက ဖီနောလစ်ဒြပ်ပေါင်းတွေရဲ့ အောက်ဆီဒေးရှင်းကို အရှိန်မြှင့်ပေးပြီး အနည်ထိုင်ခြင်း ဒါမှမဟုတ် စစ်ထုတ်ခြင်းဖြင့် ဖယ်ရှားနိုင်တဲ့ ပိုကြီးပြီး မပျော်ဝင်နိုင်တဲ့ မော်လီကျူးတွေအဖြစ် ပေါ်လီမာဓာတ်ဖွဲ့စေပါတယ်။ ဒီယန္တရားက ကြည်လင်မှုကို တိုးတက်စေရုံသာမက ဖီနောလစ်ဒြပ်ပေါင်းတွေကြောင့် ဖြစ်ပေါ်လာတဲ့ အောက်ဆီဒေးရှင်း အညိုရောင်ဖြစ်ခြင်းဖြစ်နိုင်ခြေကို လျှော့ချပေးခြင်းအားဖြင့် ဖျော်ရည်ရဲ့ သက်တမ်းကိုလည်း တိုးချဲ့ပေးပါတယ်။ ထို့အပြင်၊ လက်ကေ့စ်အခြေခံ ရှင်းလင်းချက်လုပ်ငန်းစဉ်များကို အပျော့စား စီမံဆောင်ရွက်မှုအခြေအနေများ (pH 3.5–5.5၊ အပူချိန် 25–40 °C) အောက်တွင် လုပ်ဆောင်နိုင်ပြီး ၎င်းတို့၏ အာဟာရ သို့မဟုတ် ခန္ဓာကိုယ်အစိတ်အပိုင်းဆိုင်ရာ ဂုဏ်သတ္တိများကို မထိခိုက်စေဘဲ နူးညံ့သိမ်မွေ့သော ဖျော်ရည်များအတွက် သင့်လျော်စေပါသည်။⁵⁹ပက်တင်နေ့စ်ကုသမှုသည် ဖျော်ရည်ကို ၁-၂ နာရီအတွင်း ကြည်လင်စေနိုင်သော်လည်း၊ laccase ကုသမှုသည် ဖီနောလစ်ဒြပ်ပေါင်းများကို လုံးဝလျှော့ချရန် တုံ့ပြန်မှုအချိန် (၃-၆ နာရီ) ပိုကြာရန် လိုအပ်ကြောင်း လေ့လာမှုများက ပြသခဲ့သည်။ သို့သော်၊ ဤလုပ်ငန်းစဉ်ကို အင်ဇိုင်းကို မလှုပ်ရှားနိုင်အောင်ပြုလုပ်ခြင်း သို့မဟုတ် laccase ကို စက်ပိုင်းဆိုင်ရာ ကြည်လင်စေသည့်နည်းလမ်းများနှင့် ပေါင်းစပ်ခြင်းဖြင့် အကောင်းဆုံးဖြစ်အောင် ပြုလုပ်နိုင်သည်။⁶⁰ဤလေ့လာမှုတွင်၊ ကုန်ကြမ်းထုတ်ယူမှု၏ အင်ဇိုင်းပရိုဖိုင်းရှင်းက laccase နှင့် α-amylase လုပ်ဆောင်ချက်များကို သိသာထင်ရှားစွာ ဖော်ထုတ်ပြသခဲ့ပြီး pectinase နှင့် xylanase လုပ်ဆောင်ချက်များမှာ အလွန်နည်းပါးပြီး cellulase လုပ်ဆောင်ချက်ကို မတွေ့ရှိရပါ။ ထို့ကြောင့်၊ turbidity နှင့် phenolic ပါဝင်မှု လျော့ကျခြင်းသည် အဓိကအားဖြင့် laccase ၏ လုပ်ဆောင်ချက်ကြောင့်ဖြစ်ပြီး viscosity ပြောင်းလဲမှုမှာ amylase ၏ လုပ်ဆောင်ချက်ကြောင့် တစ်စိတ်တစ်ပိုင်း ဖြစ်နိုင်သည်။
ဇယား ၁ တွင် လတ်လတ်ဆတ်ဆတ်ညှစ်ထားသော ပန်းသီးဖျော်ရည်နှင့် laccase ဓာတ်ခွဲခန်းတွင် ဓာတ်ခွဲခန်းဖြင့် ဓာတ်ခွဲခန်းပြုလုပ်ထားသော နမူနာများ၏ ရူပဗေဒနှင့် ဓာတုဗေဒဆိုင်ရာ ကန့်သတ်ချက်များကို ပြသထားသည်။ ရလဒ်များအရ လတ်လတ်ဆတ်ဆတ်ညှစ်ထားသော ပန်းသီးဖျော်ရည် (၇၁.၅၉%) ၏ ထွက်နှုန်းသည် laccase ဓာတ်ခွဲခန်းတွင် ဓာတ်ခွဲခန်းပြုလုပ်ထားသော နမူနာများ (၈၇.၃၄%) ထက် နည်းပါးကြောင်း ပြသထားသည်။ ဤရလဒ်များသည် Pilnik နှင့် Orange တို့၏ တွေ့ရှိချက်များနှင့် ကိုက်ညီပါသည်။⁶¹အသီးအနှံများ ပြုပြင်ထုတ်လုပ်ရာတွင် အင်ဇိုင်းများ အသုံးပြုခြင်းသည် ဖျော်ရည်အထွက်နှုန်းကို တိုးစေနိုင်သည်၊ စစ်ထုတ်မှုကို တိုးတက်စေပြီး အာရုံစူးစိုက်မှုအတွက် အရည်အသွေးမြင့် ကြည်လင်သော ဖျော်ရည်ကို ရရှိနိုင်သည်ဟု သူက ညွှန်ပြခဲ့သည်။ ဖျော်ရည်အထွက်နှုန်း တိုးလာခြင်းသည် အဓိကအားဖြင့် ဖျော်ရည်တွင် ပျော်ဝင်နိုင်သော သကြားဓာတ် ပါဝင်မှု တိုးလာခြင်းကြောင့် ဖြစ်သည်။ အသီးအနှံများကို အင်ဇိုင်းဖြင့် ရေဓာတ်ခွဲခြင်းအတွင်း ထုတ်ကုန်၏ ဆဲလ်နံရံများရှိ mesoglea နှင့် pectin တို့ကို ဖျက်ဆီးပြီး ကြားနေသကြားဓာတ်နှင့် အက်ဆစ်များကဲ့သို့သော ပျော်ဝင်နိုင်သော အရာများအဖြစ်သို့ ပြောင်းလဲသွားသည်။^၆၂။အင်ဇိုင်းဖြင့် ဓာတ်ပြုထားသော ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ pH တန်ဖိုးသည် ထိန်းချုပ်အုပ်စုထက် သိသိသာသာ နိမ့်ကျနေပြီး (P < 0.05) အုပ်စုနှစ်စုလုံး၏ pH တန်ဖိုးသည် သိုလှောင်မှုအတွင်း သိသိသာသာ မြင့်တက်လာသည် (ဇယား ၁)။ ဤရလဒ်များသည် Mark et al တို့၏ ရလဒ်များနှင့် ကိုက်ညီပါသည်။⁶³၊ က cashew သီးဖျော်ရည်၏ pH သည် အပူပေးပြီးနောက် သိုလှောင်ပြီးနောက် လျော့ကျသွားကြောင်း သူက မှတ်ချက်ပြုခဲ့သည်။ အင်ဇိုင်းဖြင့် ဓာတ်ပြုပြီးနောက် ပက်တင်ပျက်စီးခြင်းနှင့် galacturonic acid ဖွဲ့စည်းခြင်းသည် သိုလှောင်မှုအတွင်း pH တိုးလာရခြင်း၏ အကြောင်းရင်း ဖြစ်နိုင်သည်။ အင်ဇိုင်းဖြင့် ဓာတ်ပြုထားသော နမူနာများ၏ pH သည် သိုလှောင်မှုတစ်လျှောက်လုံး ၄.၀၅ မှ ၄.၃၁ အကြားတွင် ရှိနေခဲ့ပြီး ဓာတ်မတည့်သော ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ pH သည် ၄.၁၂ မှ ၄.၃၃ အကြားတွင် ရှိသည်။
သန့်စင်မထားသောနှင့် laccase ဓာတ်ပြုထားသော နမူနာနှစ်မျိုးလုံး၏ စုစုပေါင်းအက်ဆစ်ဓာတ် (TA) သည် သိုလှောင်ချိန်တိုးလာသည်နှင့်အမျှ လျော့နည်းလာသောလမ်းကြောင်းကို ပြသခဲ့သည် (ဇယား ၁)။ အက်ဆစ်ဓာတ်လျော့ကျခြင်းသည် အော်ဂဲနစ်အက်ဆစ်များကို ကာဗိုဟိုက်ဒရိတ် သို့မဟုတ် အင်ဇိုင်းဓာတ်ပြုမှုများအဖြစ် ပြောင်းလဲခြင်းနှင့် ဖျော်ရည်သိုလှောင်စဉ် အောက်ဆီဒေးရှင်းဖြစ်ခြင်းတို့ကြောင့်ဖြစ်သည်။⁶⁴ထိန်းချုပ်ထားသော ပန်းသီးဖျော်ရည်နှင့် အင်ဇိုင်းဖြင့် ဓာတ်ခွဲထားသော နမူနာများ၏ စုစုပေါင်း အက်ဆစ်ဓာတ်သည် အခြားဖျော်ရည်များ (စတော်ဘယ်ရီဖျော်ရည် 0.9%၊ ပလမ်ဖျော်ရည် 2.2%၊ ကွမ်ကွတ်ဖျော်ရည် 1.0%၊ ဆီးသီးဖျော်ရည် 2.4%၊ လိမ္မော်ဖျော်ရည် 0.8%) ထက် နိမ့်သော်လည်း အခြားဖျော်ရည်များ (ဥပမာ၊ သစ်တော်သီးဖျော်ရည် 0.3%) နှင့် ဆင်တူသည်။⁶²မပြုပြင်ရသေးသော လတ်လတ်ဆတ်ဆတ်ညှစ်ထားသော ပန်းသီးဖျော်ရည်ရှိ ဤကွာခြားချက်များသည် ကြီးထွားမှုအခြေအနေ၊ မျိုးရိုးဗီဇဆိုင်ရာအချက်များ၊ ရင့်မှည့်မှုအဆင့်နှင့် ပြုပြင်နည်းများကဲ့သို့သော အချက်အမျိုးမျိုးကြောင့် ဖြစ်နိုင်သည်။⁶⁵ထိန်းချုပ်မှုစနစ်နှင့် laccase ဓာတ်ပြုထားသော ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ စုစုပေါင်းအက်ဆစ်ဓာတ် လျော့ကျမှုသည် Singh et al မှ တင်ပြသော ရလဒ်များနှင့် ကိုက်ညီပါသည်။⁶⁶၇၄ ရက်ကြာ သိုလှောင်ပြီးနောက် Jin Nuo ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ စုစုပေါင်းအက်ဆစ်ဓာတ် လျော့ကျမှုနှင့် ပတ်သက်၍။ အခြားတစ်ဖက်တွင်၊ Oshmiansky နှင့် Wojdylo တို့သည်⁶⁷ရိုးရာသန့်စင်နည်းလမ်းများ၏ အကျိုးသက်ရောက်မှုကို လေ့လာသောအခါ ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ အက်ဆစ်ဓာတ်တွင် သိသာထင်ရှားသော ပြောင်းလဲမှုများကို မတွေ့ရှိခဲ့ပါ။
ဇယား ၁ တွင် တင်ပြထားသော ရလဒ်များအရ laccase ဓာတ်ပြုထားသော ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ စုစုပေါင်းပျော်ဝင်နိုင်သော အစိုင်အခဲတန်ဖိုး (TSS) သည် ဓာတ်ပြုမထားသော နမူနာထက် ပိုမိုမြင့်မားကြောင်း ဖော်ပြသည်။ ဤရလဒ်များသည် ထုတ်ဝေထားသော လေ့လာမှုများနှင့် ကိုက်ညီပါသည်။^၆၈ထို့အပြင်၊ ဇယား ၁ တွင် ထိန်းချုပ်ပန်းသီးဖျော်ရည်အုပ်စု၏ TSS တန်ဖိုးသည် ကနဦးအချိန်အမှတ်တွင် ၉.၅၈ ရှိပြီး သိုလှောင်မှုကာလအဆုံးတွင် ၁၁.၀၅ သို့ ရောက်ရှိခဲ့ကြောင်း ပြသထားသည်။ ဤတန်ဖိုးများသည် Hamid et al မှ အစီရင်ခံထားသော လတ်ဆတ်သောပန်းသီးဖျော်ရည်၏ TSS တန်ဖိုးများထက် နိမ့်ကျပါသည်။^၆၉(၁၁.၂ နှင့် ၁၁.၈၀ အသီးသီး)။ laccase ဓာတ်ပြုထားသော ပန်းသီးဖျော်ရည်နမူနာများ၏ TSS တန်ဖိုးသည် ၁၁.၂၃ မှစတင်၍ ၄°C တွင် နှစ်ပတ်ကြာသိုလှောင်ပြီးနောက် ၁၂.၉၃ အထိ သိသိသာသာမြင့်တက်လာခဲ့သည် (ဇယား ၁)။ သိုလှောင်မှုအတွင်း TSS တွင် အလားတူတိုးလာမှုကို citrus အသီးများ၊ သံပုရာသီးများနှင့် ချိုမြိန်သောလိမ္မော်သီးများတွင်လည်း တွေ့ရှိရသည်။ သိုလှောင်မှုအတွင်း စုစုပေါင်းပျော်ဝင်နိုင်သော အစိုင်အခဲ (TSS) တိုးလာခြင်းသည် polysaccharides (ကစီဓာတ်) ကို monosaccharides (သကြားဓာတ်) အဖြစ်သို့ hydrolysis၊ ဖျော်ရည်ရေဓာတ်ခန်းခြောက်ခြင်းကြောင့် အာရုံစူးစိုက်မှုတိုးလာခြင်းနှင့် ဖျော်ရည်တွင် pectin သည် ပျော်ဝင်နိုင်သော အစိုင်အခဲအဖြစ်သို့ ပြိုကွဲခြင်းတို့ကြောင့် ဖြစ်နိုင်သည်။ စုစုပေါင်းပျော်ဝင်နိုင်သော အစိုင်အခဲ (TSS) တိုးလာခြင်းသည် ပျော်ဝင်နိုင်သော သကြားဓာတ်တိုးလာခြင်းကြောင့်ဖြစ်နိုင်ပြီး pectin သို့မဟုတ် cellulose ကို pectin သို့မဟုတ် cellulose မှ ပျော်ဝင်နိုင်သော သကြားဓာတ်အဖြစ်သို့ ပြောင်းလဲခြင်းဖြင့် အသီးသီး သို့မဟုတ် ကစီဓာတ်ကို သကြားဓာတ်အဖြစ် hydrolysis ပြုလုပ်ခြင်းဖြင့် ဖြစ်ပေါ်လာနိုင်သည်ကို Hamed et al မှ ဖော်ပြခဲ့သည်။^၆၉။ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ ဂုဏ်သတ္တိများအပေါ် လက်ကေ့စ်၏ အကျိုးသက်ရောက်မှုကို မျက်မြင်အားဖြင့် မြင်တွေ့နိုင်သည်၊ အဘယ်ကြောင့်ဆိုသော် လက်ကေ့စ်ဖြင့် ကုသထားသော ပန်းသီးဖျော်ရည်သည် ကုသမထားသော ဖျော်ရည်ထက် စီးဆင်းမှု ပိုမိုကောင်းမွန်ပြီး viscosity နည်းပါးသည်ကို ပြသသောကြောင့်ဖြစ်သည်။ ဤလေ့လာတွေ့ရှိချက်ကို ဇယား ၁ တွင် မှတ်တမ်းတင်ထားသည်။ အင်ဇိုင်းဖြင့် ကုသထားသော နမူနာ၏ viscosity မှာ 1.87 cP ရှိပြီး ထိန်းချုပ်နမူနာ၏ viscosity မှာ 2.95 cP ဖြစ်သည်။ viscosity တွင် ဤသိသာထင်ရှားသော ကျဆင်းမှုသည် ပက်တင်ကဲ့သို့သော အရာများ၏ ရေထိန်းနိုင်စွမ်း မြင့်မားခြင်းနှင့် စည်းလုံးညီညွတ်သော ကွန်ရက်ဖွဲ့စည်းပုံ ဖွဲ့စည်းခြင်းကြောင့် ဖြစ်နိုင်သည်။
ဤလေ့လာမှုတွင် ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ အညိုရောင်ပြောင်းခြင်းညွှန်းကိန်း (BI) အပေါ် လက်ကေ့စ်၏ အကျိုးသက်ရောက်မှုကို ရောင်စဉ်တန်းကြည့်ကိရိယာကို အသုံးပြု၍ 420 nm တွင် စုပ်ယူမှုကို တိုင်းတာခြင်းဖြင့် စုံစမ်းစစ်ဆေးခဲ့သည်။ ရလဒ်များကို ဇယား ၁ တွင် ဖော်ပြထားသည်။ သိုလှောင်မှုအတွင်း ကုသထားသောနှင့် ကုသမှုမခံယူရသေးသော အုပ်စုနှစ်ခုလုံးတွင် ပန်းသီးဖျော်ရည်နမူနာများ၏ BI သည် တဖြည်းဖြည်း တိုးလာသော လမ်းကြောင်းကို ပြသခဲ့သည်။ BI သည် အညိုရောင်ပြောင်းခြင်းအတိုင်းအတာကို ထင်ဟပ်စေပြီး အဖြစ်ဆောင်ရွက်နိုင်သည်။^{အရေးကြီးသော}အင်ဇိုင်းဖြင့်ပြုလုပ်သော နှင့် အင်ဇိုင်းမဟုတ်သော အညိုရောင်ပြောင်းလဲမှုများ၏ အညွှန်းကိန်း။ သိုလှောင်မှုအတွင်း စုပ်ယူမှု သိသိသာသာ မြင့်တက်လာသည် (P < 0.05)။ သိုလှောင်မှု အဆုံးတွင်၊_A420ထိန်းချုပ်အုပ်စုနှင့် အင်ဇိုင်းဖြင့် ကုသထားသော အုပ်စုများတွင် ပန်းသီးဖျော်ရည်နမူနာများ၏ တန်ဖိုးသည် အသီးသီး ၂၁၇% နှင့် ၁၂၁% ခန့် မြင့်တက်လာခဲ့သည် (ဇယား ၁)။ ရလဒ်များအရ အင်ဇိုင်းကုသမှုသည် အညိုရောင်ပြောင်းခြင်းအဆင့်ကို ၅၆% ခန့် ထိရောက်စွာ လျှော့ချနိုင်ကြောင်း ဖော်ပြသည်။ Bezerra et al ၏ ရလဒ်များ။^[၁၉]] သည် ကျွန်ုပ်တို့၏ ရလဒ်များနှင့် ကိုက်ညီပါသည်။ ၎င်းတို့သည် ပန်းသီးဖျော်ရည်ကို ကြည်လင်စေရန်အတွက် laccase-glutaraldehyde-coconut fiber ကို အသုံးပြုခဲ့ပြီး ၎င်း၏ မူလအရောင်ကို 61% လျှော့ချပေးခဲ့သည်။
သစ်သီးဖျော်ရည်များတွင်ပါဝင်သော ပိုလီဖီနောများသည် လူ့ခန္ဓာကိုယ်အပေါ် အပြုသဘောဆောင်သော အာဟာရနှင့် ကုထုံးဆိုင်ရာ အကျိုးသက်ရောက်မှုများ ရှိသော်လည်း၊ ၎င်းတို့သည် ပရိုတင်းများနှင့်လည်း ဓာတ်ပြုနိုင်ပြီး ဖျော်ရည်တွင် မှုန်ဝါးခြင်း၊ အနည်ထိုင်ခြင်း သို့မဟုတ် နောက်ကျိခြင်းတို့ကို ဖြစ်စေပြီး ထုတ်ကုန်၏ အရသာနှင့် ရနံ့ကို ပြောင်းလဲစေပြီး ၎င်း၏ သိုလှောင်မှုသက်တမ်းကို လျော့ကျစေပါသည်။⁷¹ဤလေ့လာမှု၏ ရည်ရွယ်ချက်မှာ Pleurotus ostreatus NRC 620 မှ laccase ကို အသုံးပြု၍ ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ ဖီနောလစ်ဒြပ်ပေါင်းပါဝင်မှုကို ဘေးကင်းစွာလျှော့ချရန်ဖြစ်သည်။ ဇယား ၁ တွင် ဖော်ပြထားသော ရလဒ်များအရ laccase ကုသထားသော ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ စုစုပေါင်း ဖီနောလစ်ဒြပ်ပေါင်းပါဝင်မှုသည် ၄ ​​ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်တွင် သိမ်းဆည်းခြင်းမပြုမီ သိသိသာသာ လျော့နည်းသွားကြောင်း ပြသထားသည်။ ထို့အပြင်၊ လေ့လာထားသော နမူနာနှစ်ခုလုံးတွင် သိမ်းဆည်းခြင်းအတွင်း စုစုပေါင်း ဖီနောလစ်ဒြပ်ပေါင်းပါဝင်မှုလည်း လျော့နည်းသွားသည် (ဇယား ၁)။ Sandri et al မှ သုတေသနပြုခဲ့သည်။⁷²အင်ဇိုင်းဖြင့် ဓာတ်ပြုထားသော ပန်းသီးဖျော်ရည်သည် ၎င်း၏ အင်တီအောက်ဆီးဒင့် လုပ်ဆောင်ချက်နှင့် ဖီနောလစ်ဒြပ်ပေါင်း ပါဝင်မှုကို ထိန်းသိမ်းထားနိုင်ကြောင်း ပြသခဲ့သည်။ သို့သော် Lettera နှင့် အဖွဲ့၏ လေ့လာမှုရလဒ်များ။⁷³မှိုလက်ကေ့စ်ဖြင့် လိမ္မော်ရည်ကို ကုသခြင်းသည် ၎င်းတွင်ပါဝင်သော ဖီနောလစ်ဒြပ်ပေါင်းများ ပါဝင်မှုကို ၄၅% အထိ လျှော့ချနိုင်ကြောင်း ပြသထားသည်။
ဖီနောလစ်ဒြပ်ပေါင်းများသည် free radical များကို စုပ်ယူခြင်း၊ singlet oxygen လျှော့ချခြင်းနှင့် ငြိမ်းသတ်ခြင်း၊ ဟိုက်ဒရိုဂျင်အက်တမ်လွှဲပြောင်းခြင်းနှင့် free radical များသို့ အီလက်ထရွန်လှူဒါန်းခြင်းကဲ့သို့သော ဂုဏ်သတ္တိများရှိပြီး ၎င်းတို့အား အစွမ်းထက်သော antioxidants များဖြစ်စေကြောင်း ပြသခဲ့သည်။⁷⁴ထို့ကြောင့် ဤလေ့လာမှုတွင် DPPH နှင့် FRAP-based နည်းလမ်းများကို အသုံးပြု၍ ရေခဲသေတ္တာထဲတွင် ၁၄ ရက်ကြာ သိမ်းဆည်းထားသော ပန်းသီးဖျော်ရည်၏ antioxidant activity ကို အကဲဖြတ်ပါ (ဇယား ၂)။ နည်းလမ်းနှစ်ခုစလုံးသည် သိုလှောင်မှုအတွင်း antioxidant activity တိုးလာမှုကို ပြသခဲ့ပြီး ၎င်းသည် free phenolic ဒြပ်ပေါင်းများ တိုးလာခြင်း သို့မဟုတ် Maillard reaction products (MRPs) ဖွဲ့စည်းခြင်းကြောင့် ဖြစ်နိုင်ပြီး Maillard reaction products များသည် antioxidant activity တိုးလာရခြင်း၏ အကြောင်းရင်းဖြစ်နိုင်သည်။⁷⁵အင်ဇိုင်းမဟုတ်သော အညိုရောင်ပြောင်းခြင်း ဓာတ်ပြုမှုများ (ascorbic acid ပြိုကွဲခြင်း၊ Maillard ဓာတ်ပြုမှုများနှင့် သကြားဓာတ်များကို အက်ဆစ်ဖြင့် ဓါတ်ကူပေးသော ပြိုကွဲခြင်း အပါအဝင်) သည် အညိုရောင် ရောင်ခြယ်ပစ္စည်းများ (melanoidins) ကို ထုတ်လုပ်သည်။ အလယ်အလတ် ascorbic acid ပြိုကွဲခြင်း ထုတ်ကုန်များနှင့် သကြားပြိုကွဲခြင်း ထုတ်ကုန်များ (ဥပမာ carbonyl ဒြပ်ပေါင်းများ) သည် Maillard ဓာတ်ပြုမှုများမှတစ်ဆင့် အမိုင်နိုအက်ဆစ်များနှင့် ဓာတ်ပြုနိုင်သည်။⁷⁶သိုလှောင်မှုအတွင်း သစ်သီးဝလံများနှင့် ဟင်းသီးဟင်းရွက်များ အညိုရောင်ပြောင်းခြင်းကို ကျယ်ကျယ်ပြန့်ပြန့် လေ့လာခဲ့သော်လည်း၊ ဤတုံ့ပြန်မှုများအကြောင်း ကျွန်ုပ်တို့၏ နားလည်မှုမှာ အကန့်အသတ်ရှိနေဆဲဖြစ်သည်။⁷⁷FRAP နည်းလမ်းနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက laccase ဓာတ်ပြုထားသော ပန်းသီးဖျော်ရည်သည် DPPH နည်းလမ်းဖြင့် antioxidant activity သိသိသာသာ နိမ့်ကျကြောင်း ပြသခဲ့သည် (ဇယား ၂)၊ သိုလှောင်ချိန် တိုးလာသည်နှင့်အမျှ နမူနာအားလုံး၏ antioxidant activity သိသိသာသာ တိုးလာပါသည်။ antioxidant activity ကို ဆုံးဖြတ်ရန် နည်းလမ်းနှစ်ခုကို ဤလေ့လာမှုတွင် အသုံးပြုခဲ့သည်၊ အဘယ်ကြောင့်ဆိုသော် ၎င်းတို့၏ အခြေခံမူများ မတူညီသောကြောင့်ဖြစ်သည်။ DPPH နည်းလမ်းသည် free radicals များကို ပျက်ပြယ်စေနိုင်မှုကို တိုင်းတာပြီး FRAP နည်းလမ်းသည် သံအိုင်းယွန်းများကို လျှော့ချနိုင်စွမ်းကို တိုင်းတာသည်။ ထို့ကြောင့် လေ့လာထားသော နမူနာများ၏ antioxidant activity ကို ပိုမိုနားလည်နိုင်ရန် antioxidant activity ကို ဆုံးဖြတ်ရန် နည်းလမ်းများစွာကို အသုံးပြုရန် အကြံပြုအပ်ပါသည်။⁷⁸
ဤလေ့လာမှု၏ အဓိကတွေ့ရှိချက်များထဲမှ တစ်ခုမှာ *Pleurotus ostreatus* laccase NRC 620 သည် 70°C နှင့် pH 3.0 တွင် အကောင်းဆုံးလုပ်ဆောင်မှုကို ပြသသည်။ ဖျော်ရည်ကို သန့်စင်ရန်အတွက် အသုံးများသော *Trametes versicolor* နှင့် *Ganoderma lucidum* laccases ကဲ့သို့သော အခြားမှို laccases များနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက *P. ostreatus* NRC 620 သည် အပူချိန်တည်ငြိမ်မှု ပိုမိုမြင့်မားပြီး အက်ဆစ်ဓာတ် ပိုမိုများပြားသော pH ကို ပြသသည်။ *Trametes versicolor* နှင့် *Ganoderma lucidum* မှ Lacases များသည် 50-60°C အတိုင်းအတာနှင့် pH တန်ဖိုးများ 3.5 မှ 5.0 အကြားတွင် အကောင်းဆုံးလုပ်ဆောင်မှုကို ပြသလေ့ရှိသည်။ ဤကွာခြားချက်သည် အထူးသဖြင့် pH တန်ဖိုးနိမ့်သော အက်ဆစ်ဓာတ်ရှိသော ဖျော်ရည်များအတွက် ဖျော်ရည်သန့်စင်မှု စွမ်းဆောင်ရည်ကို ပိုမိုကောင်းမွန်စေနိုင်သည်။ *P. ၏ ထူးခြားသောဝိသေသလက္ခဏာမှာ အခြားလေ့လာထားသော မှို laccases များနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက *Pleurotus ostreatus* NRC 620 သည် ပိုမိုခက်ခဲသော အခြေအနေများအောက်တွင် ထိရောက်စွာ လုပ်ဆောင်နိုင်စွမ်းကို ပြသသည်။ ၎င်း၏ မြင့်မားသော အကောင်းဆုံးလုပ်ဆောင်ချက်အပူချိန်သည် စက်မှုလုပ်ငန်းအသုံးချမှုများတွင် အလားအလာရှိသော အားသာချက်များကို ညွှန်ပြနေပြီး၊ ဥပမာအားဖြင့် ပိုမိုမြန်ဆန်သော ဓာတ်ပြုမှုနှုန်းနှင့် လျော့နည်းသော အဏုဇီဝညစ်ညမ်းမှုကဲ့သို့သော အလားအလာရှိသော အားသာချက်များကို ဖော်ပြသည်။ ၎င်း၏ pH နိမ့်ခြင်းသည် ဖျော်ရည်များစွာ၏ အက်ဆစ်ဓာတ်သဘောသဘာဝနှင့် အလွန်ကိုက်ညီပြီး ဖျော်ရည်သန့်စင်ခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်များတွင် အသုံးဝင်နိုင်ပါသည်။ ဤရလဒ်များသည် ကြီးမားသောအသုံးချမှုအတွက် နောက်ထပ်စူးစမ်းလေ့လာမှုကို မှန်ကန်ကြောင်းသက်သေပြနေပြီး *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ကို ရိုးရာမှို laccase အရင်းအမြစ်များအတွက် အသုံးဝင်သော အစားထိုးတစ်ခုဖြစ်စေသည်။ ယခင်လေ့လာမှုများနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက၊ အကောင်းဆုံးအပူချိန်မှာ 60°C ဖြစ်ပြီး အကောင်းဆုံး pH မှာ 3.0 ဖြစ်ကြောင်း ကျွန်ုပ်တို့တွေ့ရှိခဲ့သည်။ 60°C တွင် 80 မိနစ်ကြာ ဓာတ်ပြုပြီးနောက် *Ganoderma lucidum* laccase သည် ထိန်းသိမ်းထားနိုင်သည်။⁴⁶၎င်း၏လုပ်ဆောင်ချက်၏ %။၇၉ Kurniawati နှင့် Nicelle ၏ အဆိုအရ⁸⁰, *Ganoderma lucidum* အင်ဇိုင်းများသည် ၂၅°C နှင့် pH တန်ဖိုးများ ၅.၀ မှ ၈.၀ အတွင်းတွင် အလွန်ကောင်းမွန်သောမှ အလယ်အလတ်တည်ငြိမ်မှုကို ပြသပြီး pH ၆.၀ နှင့် ၁၀ မှ ၃၀°C အတွင်း အပူချိန်များတွင် တည်ငြိမ်မှုကို ပြသသည်။ ဤလေ့လာမှုတွင်၊ *Pleurotus ostreatus* အတွက် အင်ဇိုင်းလှုပ်ရှားမှုအတွက် အကောင်းဆုံး pH နှင့် အပူချိန်မှာ အသီးသီး ၃.၀ နှင့် ၇၀°C ဖြစ်ကြောင်း ကျွန်ုပ်တို့ တွေ့ရှိခဲ့သည်။ ၄၀°C နှင့် ၅၀°C တွင် နှစ်နာရီကြာ ပျိုးထောင်ပြီးနောက်၊ အင်ဇိုင်းသည် ၎င်း၏လှုပ်ရှားမှု၏ ၆၈.၃၃% နှင့် ၅၉.၆၁% အသီးသီးကို ထိန်းသိမ်းထားနိုင်ခဲ့သည်။ ထို့အပြင်၊ Pleurotus ostreatus NRC 620 laccase သည် ၅၀°C မှ ၈၀°C အတွင်း အပူချိန်အတိုင်းအတာကျယ်ပြန့်စွာတွင် မြင့်မားသောလှုပ်ရှားမှုကို ပြသခဲ့ပြီး အမြင့်ဆုံးလှုပ်ရှားမှု (၆၉% မှ ၉၈%) နီးပါးရောက်ရှိခဲ့ပြီး ၇၀°C တွင် အမြင့်ဆုံးလှုပ်ရှားမှုကို တွေ့ရှိရသည်။
အဆုံးသတ်အနေဖြင့်၊ တည်ငြိမ်အခြေအနေအောက်တွင်ရရှိသော ကမာမှို laccase NRC620 သည် pH နှင့် အပူချိန်အခြေအနေအမျိုးမျိုးတွင် အကောင်းဆုံးလုပ်ဆောင်မှုနှင့် တည်ငြိမ်မှုကို ပြသခဲ့ပြီး အခြားအင်ဇိုင်းရင်းမြစ်များနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက သာလွန်ကောင်းမွန်သော တည်ငြိမ်မှုကို ပြသခဲ့သည်။ 10 mM MgSO₄ နှင့် CuSO₄ ထည့်သွင်းခြင်းသည် အင်ဇိုင်းလှုပ်ရှားမှုကို ခန့်မှန်းခြေအားဖြင့် ၂၁% နှင့် ၃၅% အသီးသီးတိုးမြှင့်ပေးခဲ့သည်။ ပန်းသီးဖျော်ရည်အဖြစ် ပြုပြင်သောအခါ အင်ဇိုင်းသည် pH နှင့် viscosity ကို လျော့ကျစေပြီး သိုလှောင်မှုအတွင်း ဖီနောလစ်ပါဝင်မှုမှာ အနည်းငယ်သာ လျော့နည်းသွားသည်။
ရလဒ်များက အစားအသောက်လုပ်ငန်း၊ အထူးသဖြင့် အဖျော်ယမကာသန့်စင်ခြင်းတွင် လက်ကေ့စ်၏ အလားအလာကို အတည်ပြုပါသည်။ ဖီနောလစ်ဒြပ်ပေါင်းများကို အထူးချေဖျက်ခြင်းဖြင့် လက်ကေ့စ်သည် မှိုင်းခြင်းကို လျှော့ချပေးရုံသာမက ကြည်လင်မှုကိုလည်း တိုးတက်ကောင်းမွန်စေရုံသာမက ပေါ့ပါးသော လည်ပတ်မှုအခြေအနေများတွင် သစ်သီးဖျော်ရည်များ၏ အရည်အသွေးကိုလည်း ထိန်းသိမ်းပေးပါသည်။ ဂျယ်လတင်၊ ဘန်တိုနိုက်နှင့် ဆီလီကာဂျယ်ကဲ့သို့သော ရိုးရာသန့်စင်ပေးသည့် အေးဂျင့်များနှင့်မတူဘဲ လက်ကေ့စ်သည် အလဟဿမဖြစ်စေဘဲ အဖျော်ယမကာများမှ သင်းပျံ့သောရနံ့များကို မဖယ်ရှားပေးသောကြောင့် ၎င်းသည် ပိုမိုပတ်ဝန်းကျင်နှင့် သဟဇာတဖြစ်ပြီး ရေရှည်တည်တံ့သော ရွေးချယ်မှုတစ်ခုဖြစ်သည်။ ထို့အပြင်၊ အခြားအင်ဇိုင်းများနှင့် စစ်ထုတ်နည်းလမ်းများနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက လက်ကေ့စ်သည် ထုတ်ကုန်အရည်အသွေးကို မထိခိုက်စေဘဲ ပစ်မှတ်ထားပြီး ကုန်ကျစရိတ်သက်သာသော ဖြေရှင်းချက်ကို ပေးဆောင်ပါသည်။
Kyomuhimbo၊ HD နှင့် Brink၊ HG။ ကြေးနီပါဝင်သော လက်ကေ့စ်များ၏ အသုံးချမှုများနှင့် မလှုပ်ရှားစေသော ဗျူဟာများ၊ ပြန်လည်သုံးသပ်ချက်။ Heliyon 9, e13156 (2023)။